Agora, um maior aprofundamento sobre técnicas de TG...

=p

Agora com mais detalhes:


A técnica somática consiste na modificação do genoma apenas das células diplóides (2N) não relacionadas a produção de gametas, só utilizada como tratamento para doenças genéticas recessivas e provoca alteração do DNA portador da patologia através de um vetor.
Apresenta como desvantagem: não há como precisar o tempo de vida da célula hospedeira; baixa expressão do gene; dificuldades com o controle da expressão gênica; dificuldade de atingir o tecido-alvo; alto potencial oncogênico, ou seja, de formar tumores (podem ser malígnos ou benígnos, mas ainda assim são tumores); etc.

A técnica germinativa envolve a alteração de todas as células do organismo, pois atua nas células reprodutivas (espermatozóides e óvulos). Essa técnica até hoje só foi usada apenas experimentalmente e por isso não está disponível para seres humanos.
Apresenta as seguintes desvantagens/problemas: questões sociais, éticas e religiosas que dividem os cientistas; alta taxa de mortalidade; desenvolvimento de tumores e malformações; alteração de embriões potencialmente normais; irreversibilidade das alterações feitas; etc.


Quanto aos métodos de inserção do material genético nos organismos, se dividem em duas formas, que são:

•in vivo:
Consiste na introdução do vetor diretamente no tecido do hospedeiro por via intravenosa. Tais vetores precisam ser “mascarados” para não serem destruídas pelo sistema imunológico. Essa forma apresenta maior facilidade de tratamento devido a sua simplicidade, porém oferece maior risco, um vez que não se tem 100% de controle sobre onde o vetor poderá agir, podendo agir no lugar errado, causar uma resposta ímune ou mesmo o aparecimento de um câncer.
No caso de se tratar de doença neurodegenerativa, a inserção do vetor é feita por injeção local, geralmente no cerebro.
Uma curiosidade: o primeiro estudo clínico foi para o tratamento da fibrose cística (doença que causa um defeito nos pulmões prejudicando a capacidade de trocas gasosas do organismo.


•ex vivo:
Nesse método, células são retiradas do organismo, modificadas, se reproduzem no meio de cultura e posteriormente repostas no organismo. Por se tratar de uma célula do próprio organismo, isso diminui a possibilidade de rejeição.
O DNA modificado dessas células pode sofrer degradação extra e intracelular e assim apresentar baixa probabilidade de aderir ao genoma e expressar as características desejadas.
Quando há sucesso, as características manifestadas são permanentes (estáveis). Quando não há, as características são transitórias.



Logo mais: Atualizações sobre métodos físicos, químicos e biológicos. FIQUEM LIGADOS!!!
;D

Virus como vetor na terapia gênica - Por Breno Ventorim

Na maioria dos estudos de terapia gênica, um gene normal é colocado dentro do genoma para substituir um gene anormal, causador de alguma doença. A molécula carreadora, denominada vetor, é usada para levar o gene terapêutico para as células-alvo do paciente. Atualmente, o vetor mais comum é o vírus, alterado geneticamente para carrear o DNA humano normal. Os cientistas têm tentado tirar vantagem da capacidade do vírus de infectar a célula humana, porém, no caso da terapia gênica, o genoma do vírus é modificado para remover os genes causadores de doença e inserir os de interesse terapêutico.

O vetor viral, portanto, leva o material contendo o gene humano terapêutico para dentro da célula-alvo. A geração de uma proteína funcional, produto do gene terapêutico, restabelece a célula-alvo, o que pode representar a cura da doença.

Condições ou desordens que surgem de mutações em um único gene são os melhores candidatos para terapia gênica. Infelizmente, desordens multigênicas ou multifatoriais, tais como doenças do coração, pressão alta, mal de Alzheimer, artrite e diabetes, seriam especialmente difíceis de serem tratadas usando essa terapia, pois são causadas por efeitos combinados de variações em muitos genes.

Um dos principais fatores que ainda mantém a terapia gênica fora dos tratamentos de escolha para doenças genéticas é a possível resposta imune desencadeada por um objeto estranho introduzido no organismo. Há sempre a insegurança de que o vetor viral atenuado, sem os genes responsáveis pela sua própria replicação, poderia readquirir a habilidade de se replicar e causar a enfermidade no paciente.

O Food and Drug Administration (FDA), órgão regulador norte-americano, ainda não aprovou nenhum produto de terapia gênica para a venda. Entretanto, as pesquisas relacionadas a ela continuam a crescer e o FDA está muito empenhado na supervisão dessa atividade. Desde 1989, o órgão recebeu cerca de 300 requisições de pesquisadores médicos e de fabricantes para o estudo e o desenvolvimento de produtos de terapia gênica. Com o objetivo de garantir a segurança das pessoas envolvidas em estudos e daquelas que eventualmente recebam produtos de TG, o FDA está supervisionando atualmente cerca de 210 protocolos ativos de estudos. Já no Brasil, o órgão responsável pela vigilância de protocolos envolvidos com terapia gênica é a Comissão Nacional de Ética em Pesquisa (CONEP).

Tipos de vírus utilizados

• Retrovírus

O material genético de retrovírus está na forma de RNA, enquanto o material genético de seus hospedeiros está na forma de DNA. Quando um retrovírus infecta uma célula hospedeira, ele introduz seu RNA junto com algumas enzimas na célula. Essa molécula de RNA do retrovírus deve produzir uma cópia de DNA a partir de si própria. O processo de produzir uma cópia de DNA a partir de uma molécula de RNA é denominado transcrição reversa. Esta é executada por uma das enzimas virais chamada transcriptase reversa. Após essa cópia de DNA ser produzida e estar livre no núcleo da célula hospedeira, ela deve ser incorporada no genoma da célula hospedeira. Isto é, ela deve ser inserida nas grandes moléculas de DNA na célula (os cromossomos). Este processo é feito por uma outra enzima viral chamada integrase.

Quando o material genético do vírus está incorporado ao material genético da célula hospedeira, pode-se dizer que a célula hospedeira está modificada por conter um novo gene. Se essa célula hospedeira se dividir posteriormente, todas as suas descendentes conterão os novos genes.

Um dos problemas da terapia gênica usando retrovírus é que a enzima integrase pode inserir o material genético do vírus em qualquer posição arbitrária no genoma do hospedeiro. Se acontece do material genético ser inserido no meio de um dos genes originais da célula hospedeira, estes genes serão interrompidos (mutagênese por inserção). Se acontece do gene ser um que regula a divisão celular, uma divisão celular incontrolável (isto é, câncer) pode ocorrer. Este problema começou recentemente a ser tratado pela utilização de nucleases de dedo de zinco ou pela inclusão de certas seqüências tal como a região de controle do lócus da beta-globina para direcionar o sítio de integração para sítios cromossômicos específicos.

Testes de terapia genética para tratar a imudeficiência combinada grave (IDCG) foram interrompidos ou restritos nos EUA quando foi relatada leucemia em três de onze pacientes tratados no teste de terapia genética de IDCG ligada a X de Terapia Francesa (XIDCG). Dez pacientes de XIDCG tratados na Inglaterra não apresentaram leucemia até hoje e tiveram sucesso similar na reconstituição imune. Teste de terapia gênica para tratar IDCG devida a deficiência da enzima Adenosina Desaminase (ADA) continuam com relativo sucesso nos EUA, Itália e Japão.

• Adenovírus

Adenovírus são vírus que possuem seu material genético na forma de um DNA dupla-hélice. Eles causam infecções respiratórias, intestinais e oculares em humanos. Quando infectam uma célula hospedeira, esses vírus introduzem sua molécula de DNA. O material genético dos adenovírus não são incorporados ao material genético da célula hospedeira. A molécula de DNA fica livre no núcleo da célula hospedeira, e as instruções nessa molécula de DNA extra são transcritas como qualquer outro gene. A única diferença é que esses genes extras não são replicados quando a célula está prestes a se dividir, assim os descendentes daquela célula não terão o gene extra. Como resultado, no tratamento com o adenovírus, será necessária uma re-administração em uma população celular crescente. Este sistema tem demonstrado real promessa no tratamento do câncer e de fato o primeiro produto de terapia genética a ser licenciado é o adenovírus.

• Vírus Adeno-associados

Pertencem à família Parvoviridae, são vírus pequenos com um genoma de DNA de fita simples. Um vírus adeno-associado selvagem pode inserir seu material genético em um local específico no cromossomo 19 (humano). Porém a versão recombinante deste vírus, que não contém qualquer gene viral, apenas o gene terapêutico, não se integra ao genoma hospedeiro. Ao contrário, o genoma viral recombinante fusiona suas extremidades por recombinação ITR (sigla em inglês para Repetições Terminais Invertidas) para formar uma versão circular, epissomal que é referida como responsável pela expressão gênica de longa duração. Há poucas desvantagens em usar vírus adeno-associados, incluindo a pequena quantidade de DNA que podem carregar (baixa capacidade) e a dificuldade em produzí-los. Este tipo de vírus está sendo usado, entretanto, porque não é patogênico (a maioria das pessoas porta este vírus inofensivo). Diferente dos adenovírus, a maioria das pessoas tratadas com vírus adeno-associados não fará uma resposta imune contra o vírus ou contra as células que foram tratadas de modo bem-sucedido com eles. Dois tecidos onde o vírus parece ser particularmente útil são o músculo e o olho. Entretanto, também foram iniciados experimentos clínicos utilizando vetores de vírus adeno-associados para levar genes para o cérebro. Isto é possível porque vírus adeno-associados podem infectar células que não estão em divisão (quiescentes), como os neurônios onde seus genomas podem ser expressados por muito tempo.

Técnicas da terapia gênica...

As técnicas de terapia gênica são relativas as células corporas: germinativas e somáticas.

A terapia gênica germinativa é caracterizada pela introdução de material genético nas células haplóides, os gametas (óvulos e espermatozóides) e a somática, pela introdução do material genético nas outras células do corpo, as diplóides ou somáticas.

A terapia consiste em inserir os genes corretos em células cujos genes estão alterados ou são incorretos. Uma vez incorretos, os genes farão com que proteínas erradas sejam produzidas podendo causar grande prejuízo ao corpo, visto que a atuação de proteínas é bem especifica. A inserção dos genes corretos em substituição dos incorretos é a forma de resolver o problema da forma mais eficaz, "cortar o mal pela raiz". Porém, não tem sido tão fácil quanto na teoria, até porque terapia genica é uma "tecnologia" recente e os cientistas não possuem todos os conhecimentos a respeito das técnicas, estágios, etc. nem mesmo conhecem tudo que se precisa conhecer sobre o material genético. Outro fato negativo em relação a terapia gênica é a possibilidade de uma resposta imunológica desencadeada pelo organismo receptor em células não afetadas, ou seja, as células boas. Por exemplo, ao tentar alterar as caractéristicas de um vírus, como o da AIDS, seria ideal se o organismo conseguisse destruir apenas o vírus, porém, tal virus se instala em células de defesa do organismo e se a tentativa de alterar o vírus alterasse o linfócito e esse passasse a ser destruído, agravaria mais a doença, por isso a terapia gênica é um campo tão perigoso.

Mesmo com todas essas limitações, isso não tem impedido pesquisas e avanços nessa área...

Logo logo, mais detalhes para vocês...

A história da terapia gênica...

...começa em meados da década de 80, com os avanços na biologia molecular, que já permitiam a clonagem e sequenciamento do DNA.

Com esses conhecimentos, cientistas que estavam atrás de uma maneira de facilitar a produção proteínas, começaram a testar a introdução de DNA humano em bactérias, o que capacitou essas bactérias a produzir determinada proteína (correspondente a parte do DNA humano que foi injetada). Essa proteína poderia ser extraída das bactérias e ser injetada em pessoas que possuíssem alguma incapacidade de produzi-la naturalmente.

-CASOS-

Um caso a ser notado é o caso de Ashanti DeSilva, uma garota de 4 anos de idade que havia nascido com um tipo de doença genética rara autoimune, chamada deficiência de adenosina deaminase, também conhecida como o mal "do menino na bolha", que a deixava suscetível ao ataque de todo microorganismo que entrasse em contato com ela.

A primeira terapia gênica autorizada foi feita em Ashanti DeSilva, em 14 de setembro de 1990, por pesquisadores do Instituto Nacional de Saúde dos EUA.

Nessa terapia, os médicos recolheram glóbulos brancos de Ashanti e cultivaram as células em laboratório. Depois, inseriram nesses glóbulos brancos os genes que faltavam (com o uso de bactérias ou vírus GM) e reintroduziram na paciente.

A principio, o resultado foi o fortalecimento do sistema imunológico da menina. Agora ela não estava mais suscetível a constantes resfriados e podia retornar a vida cotidiana.

Só que o efeito não duraria para sempre. ~drama~

Os glóbulos brancos GM só sobrevivem por alguns meses (o que é normal). Por isso a terapia gênica tem que ser refeita de período em período. E, bem, por isso se chama terapia. ~natural~

O único problema para o avanço da terapia gênica é o preconceito que ela sempre sofrerá por trabalhar com modificação genética. Mesmo que simples e sem oferecer riscos maiores para o paciente.

O que é a Terapia Gênica?

Olá leitores! Estou orgulhoso de postar a primeira matéria aqui no Geneticamente Modificado. Espero que vocês curtam. =D

Quando eu falo em Terapia Gênica ou Geneterapia o que te vem a cabeça? Provavelmente você pensou que a Terapia Gênica fosse um processo que busca modificar o material genético das células e evitar/tratar doenças, principalmente as hereditárias, não é? Ou estou superestimando vocês? Acho que não, só tenho leitores inteligentes, modéstia a parte.

Então, é isso mesmo. A terapia gênica busca suplementar com alelos funcionais aqueles genes que são defeituosos. Assim podendo tratar ou mitigar doenças (principalmente as hereditárias porque são transmitidas pelo material genético dos pais aos filhos e não são tratadas pela medicina convencional). Este alelo funcional que "substitui" o defeituoso é transportado pelo que chamamos de vetor. Este vetor transporta o DNA que contém o alelo funcional e o injeta na célula afetada. Quase sempre se usa vírus geneticamente modificados para este processo, porque, naturalmente possuem um capsula proteica que injeta material genético nas células.

Aí vai uma lista das possíveis doenças ou deficiências que podem ser tratadas/amenizadas seguindo o princípio da Terapia Gênica.

¤ Calvície

¤ AIDS

¤ Alzheimer

¤ Além de poder ajudar na recuperação de medula espinhal e na recuperação do fígado.

Lembrando que a tecnologia ainda é nova e imatura, ou seja, ainda está em fase de testes, mas já mostra bons resultados em alguns casos.

Espero ter ajudado vocês a entender um pouco sobre o que é a Terapia Gênica. Nos próximos posts aprofundaremos mais os estudos mostrado histórico da utilização deste tratamento, métodos de aplicação e suas polemicas. Até!